Cromatografía en capa fina (TLC)

Digamos que tengo un frasco con un líquido  misterioso aquí y quiero averiguar qué está   sucediendo, y el primer paso es pensar: ¿ésta es  una sola sustancia o es una mezcla de múltiples   sustancias? Y me voy a enfocar en este video  en una técnica para separar las sustancias para   conocer al menos cuántas hay. Y esa técnica  generalmente se conoce como cromatografía,   pero nos centraremos en la cromatografía de capa  fina, que es la más común que podemos encontrar.   Pero otras variaciones de la cromatografía, como  la cromatografía en papel, operan con principios   muy similares. Entonces, lo que vamos a hacer  es colocar encima de algo como vidrio o plástico   una capa delgada de una sustancia polar sólida.  Ahora, lo que normalmente se hace es poner una   capa fina de gel de sílice que es la sustancia  polar sólida más comúnmente utilizada y que   también es porosa. El que sea porosa es realmente  importante, porque queremos que el líquido tenga   acción capilar y viaje a través de ella. Ahora,  el gel de sílice, como mencioné, es muy polar;   lo que vamos a hacer es tomar parte la sustancia  misteriosa y vamos a colocar un punto de esta en   el gel de sílice, luego vamos a tomar esta placa  que tiene el gel de sílice y el pequeño punto de   nuestra sustancia misteriosa y vamos a sumergir  sólo un extremo de la placa en una solución.   Y es muy importante que la solución sea menos  polar que el gel de sílice, menos polar aquí. Y   hablaremos un poco sobre lo que sucede dependiendo  de qué tan polar sea esto. Ahora, por lo general,   esta será una cantidad muy superficial de solución  que, como veremos, será una especie de solvente y   normalmente se pone en un recipiente cerrado como  este para que este líquido no se evapore. Y luego,   ¿qué crees que va a pasar? Bueno, como mencioné,  esta es una sustancia porosa, por lo que habrá   acción capilar: este fluido en la parte inferior  se moverá hacia arriba a través del gel de sílice,   a través de los pequeños poros del gel de sílice.  Esta es la fase estacionaria. ¿Por qué la llamamos   así? Bueno, porque no se mueve, y puedes imaginar  que llamaremos a este solvente menos polar la fase   móvil, porque viaja a través del gel de sílice,  recoge parte de esta sustancia misteriosa y   la transporta. Y digamos que esta sustancia  misteriosa está compuesta de dos cosas diferentes,   si una parte de la sustancia es más polar  significa que se sentirá más atraída por la   fase estacionaria, que es muy polar, y entonces no  avanzará mucho; mientras que la parte de nuestra   sustancia misteriosa que sea menos polar no se  sentirá tan atraída por el gel de sílice, por lo   que viajará más lejos con el solvente. Entonces,  tal vez podría ser así, y harás esto hasta que la   fase móvil llegue a la parte superior del gel  de sílice, justo aquí. Y la razón por la que a   esto se le llama cromatografía es porque cuando  originalmente hicieron esto en realidad estaban   separando varios tejidos en la vegetación que  tenían diferentes colores. "Croma" se refiere a   los distintos colores, pero no tiene que referirse  necesariamente a cosas que tienen colores   diferentes. A veces es posible que necesites una  luz ultravioleta para verlos, pero cuando realizas   la cromatografía de capa fina verás que el  punto original se habrá desplazado varios grados   con el solvente y luego habrá múltiples puntos  dependiendo de cuántas cosas había en tu mezcla   original. Y como acabo de mencionar, esta cosa de  aquí, esta es la cosa menos polar, y va a viajar   más lejos que la cosa más polar, la sustancia  constituyente más polar, porque la cosa más   polar es más atractiva para el gel de sílice que  es estacionario. Y hay una manera de cuantificar   qué tan lejos viajaron estas cosas con relación a  tu solvente y esto se llama Factor de retención,   cuya abreviatura es F subíndice r, y se define  simplemente como la distancia recorrida por el   soluto dividida entre la distancia recorrida por  el solvente. Y debemos ser claros: no se trata   de la distancia total recorrida por el solvente,  sino la distancia recorrida por el solvente desde   este origen, desde donde pusimos el punto, justo  aquí, a partir del origen. Y permíteme etiquetar   esto como el origen. Así que, ¿qué sucede en  esta situación? Bueno, para ayudarnos a medir   tenemos que sacar una regla, entonces el Factor  de retención para la sustancia A, justo aquí,   etiqueto este punto como A, es igual a la  distancia recorrida por el soluto. Podemos   ver que viajó 1 centímetro, 1 centímetro entre  la distancia recorrida por el solvente a partir   del origen; y vemos que viajó 5 centímetros a  partir del origen. Entonces 1 centímetro entre   5 centímetros, que es lo mismo que 0.2, y luego el  Factor de retención de la sustancia B será igual a   ¿qué tan lejos viajó? Bueno, viajó 3 centímetros  del total de 5 centímetros del solvente a partir   de este origen, más allá de donde pusimos esta  muestra, 5 centímetros, lo que equivale a 0.6. Así   que fíjate que en esta situación, la sustancia más  polar tiene un factor de retención más bajo que la   sustancia menos polar, y eso tiene sentido porque  la fase estacionaria es más polar que el solvente,   por lo que las cosas que son más polares son más  difíciles de mover por el solvente menos polar.